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Bien qu'ils ne puissent pas être vus à l'œil nu, les bactéries sont partout. Ils existent dans la nourriture, le sol, l'eau, les surfaces de nos maisons et dans et sur notre corps. Les bactéries existent généralement dans des populations mixtes. L'isolement d'une bactérie spécifique d'autres espèces bactériennes dans un échantillon donné permet aux microbiologistes d'étudier sa structure et sa fonction, caractéristiques utilisées pour son identification. Les microbiologistes isolent souvent les bactéries à l’aide d’une des techniques de plaque à stries.
Outils
Une boucle d'inoculation est utilisée pour transférer des microorganismes. Il consiste en un fil de nichrome ou de platine avec une petite boucle circulaire à une extrémité. L'autre extrémité est droite et glisse dans une poignée. Des boucles d'inoculation jetables en plastique sont également disponibles. Les bactéries ne peuvent être isolées que si elles se développent. Les microbiologistes développent des bactéries pour l'isolement des plaques striées dans des boîtes de Petri rondes et peu profondes remplies d'un milieu solide appelé gélose. La gélose imite l'environnement dans lequel les bactéries se développent naturellement. Les plats remplis de milieux sont stériles et munis d’un couvercle pour empêcher la croissance d’organismes indésirables. Lors de l'isolation de la plaque strie, la boucle d'inoculation est stérilisée à plusieurs reprises à la flamme d'un brûleur Bunsen.
Principe
La technique de la plaque à stries est la méthode la plus répandue pour isoler des bactéries spécifiques d’un échantillon contenant un mélange de micro-organismes. La technique dilue essentiellement le nombre d’organismes et réduit leur densité. Il permet aux microbiologistes de distinguer et d’isoler des colonies bactériennes individuelles. Une colonie est un groupe visible de bactéries. Toutes les bactéries d'une même colonie proviennent de la même cellule bactérienne. Par conséquent, les colonies individuelles sont des colonies «pures». La colonie pure est transférée sur une autre plaque pour produire une culture pure composée d'un type de bactérie.
Procédure
Lorsqu'elle est effectuée correctement, l'isolement sur plaque de strie éclaircit un échantillon et permet aux cellules bactériennes individuelles de se développer en colonies isolées. Un microbiologiste commence par stériliser la boucle d'inoculation à la flamme. Elle refroidit la boucle en la touchant sur la gélose, puis plonge la boucle dans l'échantillon et l'étend en avant et en arrière pour couvrir une section de la plaque. Elle stérilise la boucle, la refroidit et inocule une seconde section adjacente de la plaque en la faisant glisser plusieurs fois à travers la première section et en recouvrant la seconde par un mouvement de zigzag. Cela ramasse un petit nombre de bactéries de la première section et les transfère à la deuxième section. Le nombre de fois que cette procédure de base est répétée dépend de la méthode de la plaque strie utilisée. Malgré la méthode, l'échantillon d'origine est utilisé pour inoculer uniquement la première section de la plaque.
Méthode de la plaque strie
Les méthodes de traitement sur plaque strie varient en fonction du nombre de sections d'agar striées. La méthode T-Streak utilise trois sections: la moitié supérieure et deux sections inférieures de taille égale. L'inoculum initial est placé dans la moitié supérieure de la plaque. Les bactéries sont traînées de la section supérieure à l’une des sections inférieures, puis de cette section inférieure à l’autre. Dans la méthode du quadrant, quatre sections de taille égale sont striées. La méthode de formation de traînées continues consiste généralement à inoculer la moitié supérieure de la plaque, à la faire pivoter de 180 degrés, et à inoculer l’autre moitié de la plaque sans stériliser la boucle ni traîner les bactéries de la section précédente.