Contenu
- Meilleure visualisation
- Identification et classification
- Détection de la viabilité
- Identification des structures cellulaires
Les microbiologistes étudient les caractéristiques des microorganismes tels que les algues, les protozoaires, les bactéries, les champignons et les virus à l'aide d'un microscope. Certains organismes tels que les protozoaires et les cellules de levure sont faciles à observer à l’aide d’un bâti humide, mais les cellules bactériennes doivent être colorées. Les scientifiques ont mis au point plusieurs méthodes telles que la coloration de Gram, la coloration acide-rapide et la coloration fluorescente pour une meilleure visualisation des cellules bactériennes et des structures cellulaires. En utilisant de telles méthodes de coloration, il est possible d'identifier les caractéristiques structurelles permettant de classer les bactéries.
Meilleure visualisation
Les organismes bactériens sont si petits que la plupart d’entre eux ne sont visibles que sous un microscope avec un grossissement de 1000X. Cependant, le simple grossissement de la taille ne fournit pas un degré de clarté suffisant, de sorte que les bactéries doivent donc être colorées avant l'observation pour fournir la clarté nécessaire à la visualisation.
Identification et classification
La coloration des bactéries pour distinguer les types de bactéries est connue sous le nom de coloration différentielle. La coloration de Gram est une telle coloration différentielle qui distingue les bactéries sur la base de leur contenu de paroi cellulaire. Dans cette méthode, les cellules bactériennes réagissent avec une coloration violet cristallisé pour prendre une couleur violette. En ajoutant un agent de décoloration, certaines cellules bactériennes perdent leur couleur alors que d'autres n'en ont pas. En ajoutant du colorant à la safranine, les cellules décolorées prennent la coloration pour apparaître en rouge tandis que les cellules bactériennes qui n’ont pas perdu de couleur restent violettes. Les cellules bactériennes qui prennent la couleur rouge sont appelées organismes à Gram négatif et celles qui ne prennent pas la couleur sont classées comme organismes à Gram positif. La coloration de Gram fournit une méthode rapide pour l'identification initiale des bactéries impliquées dans les infections. De même, la procédure de coloration acido-résistante aide à identifier spécifiquement les organismes appartenant à la classe de bactéries appelée Mycobactéries, telle que Mycobacterium tuberculosis.
Détection de la viabilité
Dans les échantillons de culture bactérienne, il est souvent important de détecter la présence de cellules bactériennes vivantes. Les méthodes de coloration telles que la coloration fluorescente aident à identifier si les cellules de culture sont viables ou non. Les bactéries vivantes ont la capacité de convertir la coloration du chlorure de 5-cyano-2,3-ditolyl-tétrazolium (CTC) en un colorant qui présente une fluorescence rouge. Par conséquent, lorsque les cultures colorées au CTC émettent une telle fluorescence, cela indique la présence de bactéries viables. L'iodure de propidium est une coloration qui agit uniquement sur les cellules non vivantes qui possèdent des membranes endommagées. Elle est donc utile pour identifier les cellules bactériennes mortes.
Identification des structures cellulaires
La coloration fournit une méthode de visualisation claire de plusieurs structures cellulaires. Par exemple, la méthode de coloration de Fuelgen permet l’identification du noyau dans les cellules bactériennes, tandis que la coloration d’Albert est utile pour visualiser les granules métachromatiques. De même, la technique d'imprégnation à l'argent permet l'identification de spirochètes. Les flagelles sont faciles à observer quand ils sont tachés de Ryu. La coloration au vert malachite aide à identifier les spores bactériennes.