Les courbes d'étalonnage sont utilisées pour déterminer la concentration de substances inconnues sur la base de mesures précédentes de solutions de concentrations connues. La précision et l'exactitude des mesures dépendent de la courbe d'étalonnage. Plus la courbe est bonne, plus la réponse est précise, plus la courbe est mauvaise, meilleure est la précision. Ceci est un type de méthode de comparaison, l'inconnu est comparé à un connu.Les courbes d'étalonnage sont utilisées pour tous les types de mesures utilisant de nombreuses machines différentes. Cet exemple utilise un spectrophotomètre.
Diluer la solution étalon à différentes concentrations. Il est typique de faire une dilution 10 fois, une dilution 20 fois, une dilution 30 fois ou une autre solution par étapes. Répéter chaque dilution deux fois pour que tous les échantillons soient en double.
Calculez les concentrations des solutions diluées. Un exemple de la nouvelle concentration pour la dilution 10 fois serait la concentration de la première solution multipliée par 0,10.
Lisez le pouvoir absorbant des solutions diluées sur le spectrophotomètre. Insérez une cuvette dans le spectrophotomètre de sorte que le repère en triangle soit aligné avec le trajet de la lumière. Fermez le couvercle du spectrophotomètre et appuyez sur le bouton zéro. Mettre à zéro la machine avec de l'eau distillée tous les cinq échantillons. Une fois la machine mise à zéro, lisez les échantillons de la même manière. La seule différence est que vous appuyez sur Entrée pour obtenir le pouvoir absorbant. Appuyez sur Entrée après avoir fermé le couvercle. Notez ces valeurs dans un cahier.
Représenter graphiquement le pouvoir absorbant par rapport aux concentrations connues calculées pour tous les échantillons. La concentration connue sera sur l'axe des abscisses et l'absorbance sur l'axe des ordonnées. Il est préférable de créer le graphique dans un programme graphique.
Utilisez le programme graphique pour calculer la ligne de régression pour les points graphiques. Il est possible de supprimer l'un des deux points pour chaque dilution pour obtenir la meilleure droite de régression. C'est le point de faire chaque dilution en double. Plus la valeur R ^ 2 est proche de 1, meilleure est la droite de régression. Notez l’équation de la droite de régression.
Lisez le pouvoir absorbant de la solution à concentration inconnue sur le spectrophotomètre. Notez cette capacité d'absorption.
Calculez la concentration de la solution inconnue à l'aide de l'équation de la droite de régression. Le pouvoir absorbant inconnu est substitué par Y dans l'équation. Vous résolvez l'équation pour X, la concentration.