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Les scientifiques et les chercheurs étudient la croissance bactérienne en préparant des cultures en laboratoire. Les boîtes de Pétri contenant de la gélose nutritive développent des cultures bactériennes à partir d'un seul coup ou d'une inoculation. Les élèves peuvent préparer chez eux des géloses nutritives à l’aide de fournitures provenant d’épiceries ou de magasins d’aliments naturels pour un projet de foire scientifique. Les appareils de cuisine classiques et les ustensiles de cuisine de base fournissent les outils nécessaires à la préparation d'un milieu de culture stérile pouvant être distribué dans des boîtes de Pétri. Suivre les techniques stériles en chauffant les matériaux et en maintenant les surfaces propres et sèches améliorera les résultats en empêchant la moisissure et les particules de contaminer la culture.
Placez un filtre à café dans une passoire et suspendez la passoire au-dessus de l'ouverture du bol transparent.
Versez lentement le bouillon dans le filtre, en veillant à ce que le bouillon ne déborde pas des côtés du filtre. Si le filtre est encrassé par des particules, retirez le filtre usagé, remplacez-le par un filtre propre et continuez à verser le bouillon.
Retirez la crépine et le filtre du dessus du bol et observez si le bouillon semble clair (c’est-à-dire qu’il n’ya pas de particules en suspension dans le liquide). Si des particules flottent dans le liquide, répétez les étapes 1 et 2 en utilisant un deuxième bol transparent et un filtre à café frais.
Placez la casserole sur la cuisinière et versez le bouillon clair dans la casserole.
Ajouter 16 onces d'eau distillée dans le pot contenant le bouillon.
Allumez le poêle et réglez le feu à moyen-bas. Faites chauffer le bouillon à feu doux (c'est-à-dire que de petites bulles apparaissent près du côté de la casserole).
Ajouter 1 cuillère à café de la poudre d'agar-agar au bouillon mijoté (environ 2,5 grammes) et agiter le mélange jusqu'à ce que la poudre soit dissoute. Assurez-vous de mélanger la poudre pour dissoudre et empêcher la gélatine de couler au fond du pot (où elle peut brûler).
Répétez l'étape 7 jusqu'à ce que toute la poudre d'agar-agar soit dissoute dans le bouillon.
Continuez à remuer le bouillon pendant environ 1 minute pour vous assurer que toute la poudre est complètement dissoute.
Éteignez la cuisinière, placez le couvercle sur la casserole et laissez le liquide refroidir au moins 15 minutes.
Disposez les boîtes de Pétri stériles dans une rangée pour faciliter l'assemblage, mais ne retirez pas les couvercles.Si vous le souhaitez, placez un dessous de plat pour contenir le pot chaud. Si vous utilisez des tasses à crème au lieu de boîtes de Pétri, stérilisez-les en les plaçant sur une plaque à biscuits recouverte de papier d'aluminium et placez-les à l'envers (à l'envers) et faites-les cuire au four pendant au moins une heure à 375 degrés Fahrenheit. Assurez-vous que les tasses et les couvercles stérilisés sont complètement refroidis avant utilisation.
Touchez délicatement l'extérieur du pot pour vérifier qu'il est chaud au toucher et placez le pot sur le dessous de plat. Si le pot est trop chaud au toucher, attendez au moins 10 minutes pour le laisser refroidir.
Retirez le couvercle et mettez de côté. Placez la louche dans le pot.
Retirez le couvercle d'une boîte de Pétri et distribuez un bouillon nutritif pour remplir le plat à mi-chemin. Couvrir le plat immédiatement avec sa couverture.
Répétez l'étape 14 pour chacune des boîtes de Pétri.
Laisser le bouillon nutritif se solidifier dans les boîtes de Pétri pendant au moins 1 heure, sans être dérangé.
Agitez doucement les boîtes de Pétri d'un côté à l'autre pour vérifier que le bouillon de nutriments s'est complètement solidifié. Si le bouillon n'est pas complètement gélifié, attendez encore 20 minutes avant de vérifier à nouveau.
Couvrez une table ou une surface plane avec un rouleau d'essuie-tout pour créer un espace de travail stérile. Détachez une feuille d'essuie-tout et pliez-la quatre fois pour créer un épais tampon rectangulaire. Placez ce tampon sur une extrémité de la zone de travail.
Transférez une boîte de Pétri dans la zone de travail stérile et retirez le couvercle. Retournez délicatement le plat et placez une extrémité sur le côté du coussin replié, de sorte qu’il soit renversé et légèrement incliné (avec un léger espace entre les tampons de papier essuie-tout).
Retournez le couvercle et placez-le au-dessus de la boîte de Pétri sur la surface de travail stérile. Si des gouttelettes d'eau apparaissent sur le couvercle, secouez-le doucement avant de le placer sur la surface couverte, mais ne touchez pas l'intérieur du couvercle.
Répétez les étapes 19 et 20 pour chaque boîte de Pétri, en plaçant un côté de la boîte inversée sur le côté de la boîte précédente plutôt que le tampon d'essuie-tout. Les plats apparaîtront comme un ensemble décalé, avec des trous sur un côté afin que l'excès d'humidité puisse s'évaporer.
Examinez les boîtes de Pétri inversées pour vérifier si l'humidité des côtés des plaques s'est évaporée. Une fois que toute l’humidité a disparu, tournez les plaques à droite et couvrez-les immédiatement pour utilisation.
Inoculer la gélose nutritive sur la plaque en essuyant un coton-tige contenant la culture souhaitée sur la surface de la gélose nutritive avant de couvrir avec le couvercle. Retournez la boîte de Pétri de sorte que le solide soit sur le dessus. Conservez la boîte de Pétri inoculée avec le solide en haut pour la culture et le couvercle en bas pour capter l’humidité, les particules en vrac ou la croissance.