Contenu
- HPLC et techniques similaires
- Rapidité, efficacité et précision
- Coût et Complexité
- Sensibilité et résolution
La HPLC offre une méthode rapide, automatisée et très précise pour identifier certains composants chimiques dans un échantillon, mais elle peut être coûteuse, complexe et ne fonctionne pas pour tous les échantillons. Les laboratoires médicaux, médico-légaux, environnementaux et de fabrication utilisent cette technique pour quantifier et séparer les produits chimiques contenus dans un échantillon. La HPLC présente à la fois des avantages et des inconvénients par rapport à d’autres techniques.
HPLC et techniques similaires
Comme d'autres formes de chromatographie, la HPLC permet la séparation des constituants chimiques grâce à l'utilisation d'une phase mobile et d'une phase stationnaire. La phase mobile est liquide et la phase stationnaire est solide. Parce que les différents composants se déplacent à des vitesses différentes, ils se séparent les uns des autres. Les techniques alternatives incluent l'électrophorèse capillaire, où les substances migrent à travers des solutions dans un champ électrique, et d'autres méthodes chromatographiques telles que l'extraction en phase solide, la chromatographie en phase gazeuse et la chromatographie en couche mince.
Rapidité, efficacité et précision
Comparée à d'autres techniques chromatographiques, telles que la CCM, la HPLC est extrêmement rapide et efficace. Il utilise une pompe, plutôt que la gravité, pour forcer un solvant liquide à travers un matériau adsorbant solide, avec différents composants chimiques se séparant lorsqu'ils se déplacent à des vitesses différentes. Le processus peut durer environ 10 à 30 minutes et offre une résolution élevée. Il est précis et hautement reproductible. Comme il est largement automatisé, les exécutions de base HPLC peuvent être effectuées avec une formation minimale.
Coût et Complexité
Malgré ses avantages, la HPLC peut être coûteuse, nécessitant de grandes quantités de produits organiques coûteux. Des techniques telles que l'extraction en phase solide et l'électrophorèse capillaire peuvent être moins chères et encore plus rapides, en particulier pour l'analyse dans de bonnes pratiques de fabrication. Bien qu'il soit relativement facile d'utiliser les méthodes HPLC existantes, il peut s'avérer complexe de résoudre des problèmes ou de développer de nouvelles méthodes. Cela est dû en grande partie à la diversité des modules, colonnes et phases mobiles.
Sensibilité et résolution
En général, la HPLC est polyvalente et extrêmement précise pour identifier et quantifier les composants chimiques. Plusieurs étapes étant nécessaires, la précision de la HPLC dépend en grande partie de l’automatisation du processus et, par conséquent, de sa grande reproductibilité. La CLHP a une faible sensibilité pour certains composés, et certains ne peuvent pas être détectés car ils sont adsorbés de manière irréversible. Les substances volatiles sont mieux séparées par chromatographie en phase gazeuse.