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Escherichia coli, E. coli, est une bactérie qui se développe dans les intestins inférieurs des mammifères. Cette bactérie a été découverte pour la première fois à la fin des années 1800. Depuis lors, il est utilisé depuis longtemps dans la recherche scientifique. C'est l'organisme le plus utilisé en génétique moléculaire. Une des raisons pour lesquelles E. coli est couramment utilisé dans la recherche scientifique est qu’il est facile de le cultiver en laboratoire. Les facteurs qui rendent E. coli facile à cultiver sont ses besoins nutritionnels simples, son taux de croissance rapide et ses besoins en entretien modéré.
Stérilisez la boucle d'inoculation en la plaçant dans la flamme du bec Bunsen. Passez la moitié inférieure de la boucle à travers la flamme jusqu'à ce qu'elle devienne rouge.
Laisser refroidir la boucle. Vous pouvez le toucher à la gélose stérile sur la plaque pour vous assurer qu'elle a refroidi. Ne placez pas la boucle sur la table et ne la laissez pas entrer en contact avec autre chose que de la gélose stérile ou la culture souhaitée maintenant qu'elle a été stérilisée.
Trempez la boucle dans la culture de E. coli puis retirez-la.
Ouvrez la plaque de gélose et glissez doucement la boucle d'avant en arrière sur la surface d'une section de la gélose. Veillez à ne pas rayer la gélose avec la boucle. La gélose fournit les nutriments dont E. coli a besoin pour se développer.
Placez à nouveau la boucle dans la flamme du brûleur Bunsen pour la stériliser. Une fois que la tige de la boucle a refroidi, placez-la sur une section stérile de la plaque pour vous assurer qu'elle est froide, puis faites glisser la boucle dans votre première série pour en faire une deuxième. Cette deuxième série est une version diluée de la première série. Répétez ce processus de stérilisation et de glissement jusqu'à ce que plusieurs sections de la plaque d'agar aient été glissées. La raison pour laquelle vous faites cela est que vous pouvez plus tard choisir parmi des colonies uniques, clonales. Cela vous aidera à vous assurer que vous avez au moins une section qui a des colonies individuelles - pas trop concentrée (qui aura trop de croissance, et ne vous permettra pas de choisir dans une seule colonie) et pas trop diluée (qui ne donnerait pas de colonies) .
Stérilisez la boucle dans la flamme une dernière fois avant de la mettre de côté dans la zone de travail.
Remettez le dessus sur la plaque de gélose. Retournez la plaque et placez-la dans l'incubateur à 37 degrés Celsius (98,6 degrés Fahrenheit). Cette température d'incubation idéale simule la température du corps humain où réside E. coli. Dans les 24 à 48 heures, des colonies visibles de bactéries E. coli apparaîtront dans la plaque de gélose.