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La biochimie étudie des molécules telles que l'ADN, l'ARN et les protéines. Les techniques de transfert sont ce que les scientifiques utilisent pour séparer ces types de molécules. Dans les cellules, ils existent en mélange. Le blotting permet aux chercheurs de trouver une protéine parmi beaucoup d'autres, comme une aiguille dans une botte de foin. Le transfert est généralement effectué en laissant un mélange d’ADN, d’ARN ou de protéines traverser une plaque de gel. Ce gel permet aux petites molécules de se déplacer plus rapidement que les plus grosses. Les molécules séparées sont ensuite pressées contre une membrane, ce qui aide à déplacer les molécules du gel sur la membrane. Les molécules adhèrent à la membrane, mais restent au même endroit, séparées les unes des autres, comme si elles étaient encore dans le gel.
Western Blot
Le Western Blot est une technique courante pour séparer les protéines par taille mais en colonnes droites. Ces colonnes parallèles permettent aux chercheurs de comparer la quantité de protéine entre différents échantillons qui sont placés les uns à côté des autres, comme des pistes de bowling. Par exemple, si vous testiez l'effet de différentes quantités d'un médicament sur la croissance cellulaire, vous traiteriez quatre groupes de cellules différents avec une quantité différente de médicament. Ensuite, vous pouvez ouvrir les cellules et répartir les protéines de chaque groupe sur un gel. En répartissant les protéines de cette manière, vous pouvez voir ce que fait une concentration croissante de médicaments sur une certaine protéine.
Northern Blot
Northern blot est utilisé pour détecter l'ARN. Les cellules peuvent être ouvertes pour libérer leur ARN. Les ARN provenant de différents types de cellules peuvent être traités sur des pistes séparées sur un gel. Le gel répartit les différents ARN par taille. Ces rangées d'ARN parallèles permettent à un chercheur de comparer quel type de cellule contient quelle quantité d'ARN. Cette méthode permet à un chercheur de déterminer si les cellules d'une maladie donnée ont plus de cet ARN ou moins de cet ARN. Northern blot peut révéler le fonctionnement d’une maladie au niveau de la production d’ARN.
Southern Blot
Southern blot est la technique de transfert originale, à l'origine du système de nommage. Il a été inventé par Edwin Southern. Le transfert de Southern est utilisé pour détecter la quantité d'ADN dans un mélange. Tout comme pour les protéines et l'ARN, l'ADN d'une cellule peut être libéré lorsque cette cellule est ouverte. Le transfert de Southern sépare l'ADN de différents types de cellules par taille. L'ADN de chaque échantillon est réparti dans des lignes nettes et parallèles. Des fragments individuels d’ADN peuvent être détectés à l’aide d’une sonde radioactive ou fluorescente, conçue pour se lier uniquement à ce fragment d’ADN. Le signal d'énergie d'une sonde radioactive ou les éclairs de lumière d'un signal fluorescent indiquent aux chercheurs quelle quantité de ce fragment d'ADN se trouve dans chaque échantillon.
Autres taches
Les trois principales techniques de transfert - Ouest, Nord et Sud - ont été modifiées de différentes manières pour détecter des molécules légèrement différentes. Le transfert Western par rapport au transfert Southern, par exemple. détecte les protéines et l'ADN, respectivement. Chaque technique modifiée est généralement effectuée de la manière habituelle, mais utilise une méthode différente pour détecter la molécule en cours de dispersion dans les voies parallèles. Les transferts du sud-ouest détectent des molécules de protéines collées à l'ADN. Northwestern blots détectent des molécules de protéines collées à l'ARN. Les tests Farwestern détectent des molécules de protéines collées à d'autres protéines.