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Isoler les bactéries du sol est une première étape importante dans de nombreuses expériences de microbiologie. Une fois qu'elles sont isolées, les bactéries peuvent être analysées plus en détail afin de déterminer des éléments tels que leur espèce et leur fonction dans l'environnement du sol. Même une infime quantité de sol peut contenir des millions de bactéries, il est donc nécessaire de diluer un échantillon de sol avant d’isoler les bactéries de l’échantillon.
Mesurer 100 ml. eau distillée dans le cylindre gradué et l'ajouter à la bouteille stérile.
Peser 1 g de l’échantillon de sol et l’ajouter à la bouteille d’eau distillée.Fermez bien le flacon et agitez-le pour bien mélanger la solution.
Étiquetez les éprouvettes stériles "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" et "10 ^ -6". Ajoutez 9 ml d’eau distillée dans chacun des tubes à l’aide d’une des pipettes.
Transférer 1 ml de la solution dans la bouteille dans le tube "10 ^ -3", en utilisant une nouvelle pipette. Boucher le tube et agiter doucement jusqu'à ce que la solution soit bien mélangée.
Transférer 1 ml de la solution dans le tube "10 ^ -3" dans le tube "10 ^ -4" avec une nouvelle pipette. Boucher le tube "10 ^ -4" et agiter pour mélanger. Répétez cette méthode pour transférer la solution du tube "10 ^ -4" au tube "10 ^ -5", puis du tube "10 ^ -5" au tube "10 ^ -6".
Plaque trois échantillons chacun des tubes "10 ^ -4", "10 ^ -5" et "10 ^ -6". Utilisez une nouvelle pipette pour transférer 1 ml de solution du tube dans une boîte de Pétri. Ajouter environ 15 ml de gélose nutritive dans la plaque; puis placez le couvercle sur la plaque et agitez doucement pour que la gélose recouvre le fond de la plaque.
Faites une plaque de contrôle en mettant 1 ml d’eau distillée dans une boîte de Pétri, à l’aide d’une pipette neuve. Ajouter de l'agar; Mettez le couvercle et tournez la plaque.
Laissez les plaques de Petri debout jusqu'à ce que la gélose soit prise. Ensuite, retournez les plaques et faites-les incuber, soit dans un incubateur, soit à la température ambiante, pendant aussi peu que 24 heures et jusqu'à cinq jours.
Retirez les plaques de l'incubateur après le temps d'incubation souhaité. Compter les colonies bactériennes sur des plaques contenant environ 30 à 300 colonies. Utilisez un marqueur permanent pour marquer les colonies que vous avez déjà comptées afin d'éviter de compter les mêmes colonies deux fois.
Divisez le nombre de colonies comptées par la dilution "10 ^ -4", "10 ^ -5" ou "10 ^ -6" - de la solution de sol pour chaque plaque. Trouvez le nombre de bactéries cultivables dans le gramme de sol d'origine en faisant la moyenne des résultats de chaque plaque dénombrable.