L'agar est une substance semblable à une gelée dérivée de la paroi cellulaire purifiée d'algues rouges.Il est ajouté aux milieux microbiologiques, qui sont des matériaux sur lesquels des microorganismes sont cultivés en laboratoire, afin de donner une structure plus solide à la substance. La gélose n'a aucune valeur nutritive. Par conséquent, lorsque les scientifiques l'utilisent pour cultiver des micro-organismes, ils ajoutent divers nutriments afin d'accroître la croissance bactérienne dans des boîtes de Pétri ou des éprouvettes. Lorsque les chercheurs stockent des bactéries dans un tube à essai, on parle de «gélose inclinée», car le milieu de croissance liquide se solidifie alors que le tube est en position inclinée. Un capuchon à vis sur la pente empêche la gélose de se dessécher.
Le milieu est préparé différemment pour les plats inclinés que les boîtes de Pétri. La stérilisation se fait avec la gélose dans les tubes; les boîtes de Pétri sont pré-stérilisées avant de leur verser de la gélose stérile. Mesurer la quantité d’eau nécessaire et la verser dans un erlenmeyer. Chauffez-le sur une cuisinière jusqu'à ce qu'il soit presque bouillant. Ajoutez d'autres ingrédients si nécessaire et mélangez le mélange lentement et constamment jusqu'à ce qu'ils se dissolvent. Ces ingrédients peuvent inclure des extraits de boeuf, de la peptone et des tampons de pH, en fonction du type de microorganisme cultivé.
Avant d'ajouter la poudre de gélose déshydratée, mélangez-la avec une petite quantité d'eau distillée froide pour éviter les grumeaux. Soyez prudent lorsque vous ajoutez de la gélose au liquide chaud, car elle peut mousser et déborder du pot. Ajouter de petites quantités de gélose à la fois et mélanger pour bien répartir la gélose. Eteignez le feu lorsque le mélange commence à cuire à la vapeur, avant de bouillir.
Placez les éprouvettes non bouchées sur un support d’éprouvettes. Remplissez les éprouvettes en transférant environ 5 millilitres - environ 0,17 once ou 1 c. À thé - de la gélose fondue du pot à l'aide d'une pipette stérile. Fermez chacun des tubes à essai sans serrer, car la gélose ne sera pas stérilisée si elle est scellée hermétiquement. Stérilisez tous les tubes dans un autoclave pendant environ 25 minutes à 121 degrés Celsius ou 250 degrés Fahrenheit.
Lorsque la gélose est encore chaude, inclinez avec précaution le support qui maintient les éprouvettes sur une surface solide ou un livre épais, en veillant à ce que le milieu à l'intérieur des éprouvettes se trouve dans une position inclinée par rapport à celles-ci. Laisser le milieu refroidir et se solidifier à cet angle, ce qui augmente la surface de la gélose. Serrer les bouchons des éprouvettes après le refroidissement de la gélose. Les pentes sont prêtes à l'emploi une fois que la gélose s'est solidifiée. Ils peuvent être conservés à la température ambiante ou au réfrigérateur pour une utilisation ultérieure.
Inoculer l'inclinaison en transférant des cellules avec une boucle d'inoculation d'un microorganisme à une seule colonie sur une plaque à la surface inclinée. Déplacez la boucle sur la surface de l'inclinaison et rebouchez les tubes. Incuber le biais jusqu'à ce qu'il y ait des signes de croissance, puis placez le tube dans un réfrigérateur.